摘要：环境相关的生殖健康问题日益严峻，聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)是睾丸内检出量最大的一类微塑料，其是否通过影响肠道菌群和紧密连接蛋白(Claudin 1、Occludin、ZO 1)表达参与睾丸的损伤尚不清楚。30只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和PS-MPs组(灌胃浓度1 mg·kg-1·d-1)，染毒周期42 d，应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中游离睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平，普鲁士蓝和Masson染色观察睾丸组织病理学变化，γ-H2AX免疫荧光法检测睾丸组织DNA损伤，16S rRNA测序技术检测PS-MPs对小鼠肠道菌群的影响，结合免疫组化法分析PS-MPs对紧密连接蛋白(Claudin 1、Occludin、ZO 1)表达的影响，探究PS-MPs对雄性小鼠睾丸的损伤效应及其机制。结果表明，1 mg·kg-1·d-1 PS-MPs灌胃42 d后，可导致血清T水平降低、睾丸病理学改变、氧化损伤(活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平升高)及DNA损伤(γ-H2AX蛋白荧光强度增加)，并显著增加睾丸紧密连接蛋白Claudin 1、Occludin、ZO 1的表达，且这种增加可能与肠道菌群厚壁菌门(Firmicutes)中乳酸杆菌属(Lactobacillus)丰度下降有关。综上，PS-MPs可能通过重塑肠道微生物和上调Claudin 1蛋白表达诱导小鼠睾丸损伤，研究结果为临床防治PS-MPs相关的睾丸疾病提供参考依据。
文章目录
1 材料与方法(Materials and methods)
1.1 试剂
1.2 实验动物与分组
1.3 血清激素水平检测
1.4 睾丸组织病理学分析
1.5 睾丸组织DNA损伤检测
1.6 睾丸组织氧化应激水平检测
1.7 睾丸组织免疫组化分析
1.8 肠道16S rRNA测序
1.9 环境因子关联分析
1.10 统计学方法
2 结果(Results)
2.1 PS-MPs对小鼠血清激素的影响
2.2 PS-MPs对睾丸组织病理学的影响
2.3 PS-MPs对睾丸组织氧化应激及γ-H2AX蛋白的影响
2.4 PS-MPs对睾丸组织Claudin 1、Occludin、ZO 1蛋白表达的影响
2.5 PS-MPs对肠道菌群多样性及组成的影响
2.6 PS-MPs对睾丸屏障相关蛋白与肠道菌群的相关性的影响
3 讨论(Discussion)
