摘要：目的 探究天麻素(GAS)调控miR-181b对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠行为及脑水肿的作用机制。方法 将120只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、TBI模型组(Model组)、低剂量GAS组(GAS-L组,50 mg/kg GAS)、高剂量GAS组(GAS-H组,100 mg/kg GAS)、高剂量GAS+miR-181b antagomir NC组(GAS-H+miR-181b antagomir NC组,100 mg/kg GAS+200 nmol miR-181b antagomir NC)和高剂量GAS+miR-181b antagomir组(GAS-H+miR-181b antagomir组,100 mg/kg GAS+200 nmol miR-181b antagomir),每组20只大鼠。采用改良神经功能缺损严重程度评分量表(mNSS)对各组大鼠神经功能进行评估。采用转棒测试、旷场实验评价大鼠行为学变化。干湿重法测定大鼠脑组织含水量。HE染色观察大鼠脑组织病理学变化。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定各组大鼠脑组织miR-181b水平。Western blot法测定大鼠脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、水通道蛋白-4(AQP-4)的表达水平。结果 与Sham组相比,Model组大鼠mNSS评分、脑组织含水量、脑组织MMP-9、AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05),转棒测试跌落时间、旷场实验区域中心停留时间、脑组织miR-181b水平显著降低(P<0.05),大鼠脑皮质神经元萎缩,结构紊乱,细胞轮廓不清晰,出现严重的脑损伤。与Model组相比,GAS-H组大鼠相关指标变化趋势与上述相反(P<0.05)。miR-181b antagomir减弱了GAS对TBI导致的大鼠行为学障碍和脑水肿的减轻作用。结论 GAS可能通过提高miR-181b的表达来改善TBI导致的大鼠行为学障碍和脑水肿。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂与仪器
1.3 TBI大鼠模型的建立
1.4 动物分组与给药
1.5 大鼠神经功能评分
1.6 转棒测试检测大鼠行为学
1.7 旷场实验检测大鼠行为学
1.8 干湿重法测定大鼠脑组织含水量
1.9 HE染色观察大鼠脑组织病理学变化
1.10 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定各组大鼠脑组织miR-181b水平
1.11 Western blot法测定大鼠脑组织中MMP-9、AQP-4的表达水平
1.12 统计学方法
2 结果
2.1 GAS对大鼠神经功能的影响
2.2 GAS对大鼠行为学变化的影响
2.3 GAS对大鼠脑皮质病理学的影响
2.4 GAS对大鼠脑组织含水量及miR-181b水平的影响
2.5 GAS对各组大鼠脑组织中MMP-9、AQP-4表达水平的影响
3 讨论
