基于CA-TM融合蛋白的梅迪-维斯纳病毒胶体金免疫层析检测方法的建立与应用

2024-04-02 150 0.77M 0

旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白(rCA-TM)标记检测线,以鸡IgY抗体标记质控线,以重组链球菌蛋白(r-SPG)与鸡IgY用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶体金免疫层析快速检测方法,并通过特异性、敏感性、稳定性以及临床应用对其检测效果进行评价。结果显示,成功表达、纯化并获得了rCA-TM;成功建立的胶体金免疫层析法特异性试验结果显示不能检测除MVV以外的如口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体、布鲁菌等绵羊常见病原;敏感性试验结果显示最低可检出2400倍稀释的MVV阳性血清;稳定性试验结果显示在模拟6个月避光常温密封保存后的试纸条仍具有良好的检测性能。利用建立的MVV胶体金检测法和广泛应用于MVV检测的进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒对40份疑似病例血清样品进行对比检测,结果显示:用胶体金检测方法检出MVV抗体阳性血清17份,阴性血清23份;用进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出阳性血清16份,阴性血清24份,二者相比整体符合率为97.5%。综上,成功建立了MVV胶体金免疫层析快速检测方法,该方法研制的检测试纸条性能良好、便于储存、适合现场快速检测和批量检测,对MVV的监测、防控有重要意义,为内蒙古地区MVV的净化提供新的检测方案。 



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