游离酶的纯化成本高及其难以重复利用的弊端制约了其在绿色生化工业的应用,而具有良好性能的固定化酶是其工业化的必要条件。为降低糖基转移酶在催化合成人参皂苷Rh2过程中分离纯化的成本及克服游离酶不能重复利用的难题,合成了一种具磁性的Fe3O4/MPN-Ni2+材料,其可在固定重组糖基转移酶(UGT)的同时完成纯化,所得固定化酶可从反应中快速分离以重复使用。经验证,固定化材料对UGT有特异性吸附作用,且固定化酶(Fe3O4/MPN-Ni2+@UGT)具有高的载酶量(100.91 mg/g)和稳定性,6个循环后仍保持了65.07%的活性。储存21 d后,活性仍有54.01%。最适条件下,固定化酶可催化合成40.73μg/mL的Rh2,且底物人参二醇(PPD)的转化率为70.88%。这种低成本、高效、稳定的材料在酶纯化和合成人参皂苷方面具有巨大的工业应用潜力和价值。
